جمع‌آوری تخمک‌ها
مرحله بعدی پس از هورمون درمانی، گرفتن تخمک (عمل پانکچر) است. با برانگیختن تخمک‌گذاری تخمدان‌ها به‌اندازه پرتقال متوسط بزرگ‌شده و بیشتر در نزدیکی دیواره واژن قرار می‌گیرند این امر یاری می‌کند که پزشک تحت بیهوشی عمومی یا جایگاهی از راه دیواره واژن تخمک‌ها را از تخمدان جمع‌آوری نماید. عمل پانکچر بیشتر با یاری مشاهدات سونوگرافی از راه واژن (مهبل) انجام می‌شود. در این روش از مسیر واژینال با سوراخ کردن فولیکول‌ها، درون‌مایه آن‌ها که تخمک و مایع فولیکولی است خارج می‌گردد. پزشک درحالی‌که چگونگی تخمدان را در صفحه تلویزیونی سونوگرافی تحت نظر دارد یک سوزن بلند را از راه واژن وارد تخمدان نموده و تخمک‌های بالغ را به‌وسیله پمپ مکش جمع‌آوری می‌نماید. در برخی موارد استخراج تخمک از راه لاپاراسکوپی انجام می‌گیرد. لاپاراسکوپی یک روش جراحی است که بیشتر نیاز به بیهوشی عمومی دارد. در این روش پزشک با استفاده از دستگاه لاپاراسکوپ قادر به مشاهده تخمدان‌ها ولوله‌های رحمی می‌شود و آشکارا از تخمدان، با استفاده از دستگاه مکنده، فولیکول‌ها را تخلیه می‌نماید.
تهیه و آماده‌سازی اسپرم:
بامداد روز جمع‌آوری تخمک‌ها، مایع منی از همسر بیمار تهیه و پس از شستشو و آماده‌سازی، اسپرم‌های سالم و بسیار پرکار جدا می‌شوند.
